A tecnologia em microbiologia enológica

PCR

Até hoje para controlar a microbiologia em adega desde a fermentação alcoólica ou maloláctica, passando pelo controlo de contaminações no processo de estágio e finalizando no controlo microbiológico no engarrafamento, têm-se utilizado meios de cultivo tradicionais. Estes meios surgem combinados com análises químicas estudando marcadores específicos como a acidez volátil ou os fenóis voláteis, entre outros.

Cromatógrafos de gases, espectrofotómetros e agora o PCR (detector genético em tempo real).

O que é o PCR Real Time?

De acordo com a definição de PCR que aparece na Wikipedia:

A reacção em cadeia da polimerase, conhecida como PCR pelas siglas em inglês (Polymerase Chain Reaction), é uma técnica de biologia molecular descrita em 1986 por Kary Maullis, cujo objectivo é obter um grande número de cópias de um fragmento de ADN particular, partindo de um mínimo; em teoria basta partir de uma única cópia de esse fragmento original, o molde.

Esta técnica serve para amplificar um fragmento de ADN. A sua utilidade é que, após amplificação, é muito mais fácil identificar com uma muito alta probabilidade o vírus ou a bactéria causadores de uma doença, identificar pessoas (cadáveres) ou fazer investigação científica sobre o ADN amplificado. Estes usos derivados da amplificação tornaram esta técnica muito expandida, com a consequente baixa de preço do equipamento necessário para a realizar.

Esta nova tecnologia permite identificar e quantificar por detecção do ADN os diferentes microorganismos (leveduras e bactérias) que podemos encontrar no vinho.

Ainda que esta tecnologia hoje nos pareça ficção, neste momento é tão simples como qualquer outra análise que podemos realizar nos laboratórios das adegas.

Os processos são simples:

* Preparar a amostra: com a ajuda de uma pequena centrífuga.

* Obter o ADN total: extrair e purificar com o Maxwell de Promega.

* Detecção genética por PCR em tempo real: amplificar, detectar, reconhecer e quantificar os microorganismos com o SmartCycler d’Cepheid.

* Ler, interpretar os resultados e actuar.

Aplicações:

* Diagnóstico parcelar (vinha, uva).

* Controlo higiénico e sanitário das instalações.

* Prevenção de contaminações (mosto, vinho).

* Controlo microbiológico no engarrafamento.

Primeiras aplicações disponíveis:Brettanomyces, Zygosaccharomyces, Acetobacter, Gluconobacter, Lactobacilllus, Pediococcus.

Podem obter mais informação neste vídeo gravado na última edição da Enomaq em Saragoça. Jean-Françoise Gilis, no stand da Az3 Oeno, explica mais sobre o PCR real time e a detecção de microorganismos no vinho.



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